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[每周一例] 遲緩愛德華氏菌和虹彩病毒混合感染引起冬棚養殖點籃子魚死亡一例

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[病例278]
       廣東珠海市斗門區白蕉鎮一冬棚點籃子魚養殖池塘,面積6.5畝,水深1.5米,3臺增氧機(見圖1)。目前規格1~2兩左右。

       2013年12月末在原塘就有死亡,過塘后死亡量增加,用過大量的藥物均無效,最多的時候一天死亡1000多尾。


       2014年3月8日下午5點到現場調查,水色呈濃黃綠色,透明度15~20cm,水溫22℃(春節時最高水溫達到30℃),簡易測試盒檢測水質指標:pH值8.2,亞硝酸鹽0.15mg/L,氨氮測不出。從塘中取4尾發病后瀕死的點籃子魚,發病魚體色發黑,其中3號魚雙眼突出、出血,鰭基出血,其它魚外觀無明顯異常癥狀(見圖2)。解剖見鰓絲有少量出血點,有的鰓蓋內膜出血(見圖3),肝臟發黃(見圖4),脾臟嚴重腫大(見圖5)、腎臟水腫、出血(1號魚,見圖6)。分別從4尾發病魚的肝臟和腎臟中(其中兩尾還從腦和眼接種)進行細菌分離培養,并取鰓、肝臟、脾臟、腎臟、腦和眼等用95%酒精及波恩氏液固定做病毒檢測及病理組織切片觀察。


       病毒檢測結果:4尾魚中有3尾檢測出真鯛虹彩病毒(見圖7)。


       細菌分離結果:在28℃經24小時培養,從4尾魚中分離出兩種優勢細菌(見圖8)。一種細菌在4尾魚體內都分離到,在普通營養瓊脂培養皿上形成圓形、隆起、灰白色、濕潤并帶有光澤、呈半透明狀的菌落,革蘭氏染色陰性、兩端鈍圓、散在或個別成雙排列的短桿菌(見圖9),經16S rDNA測序鑒定為遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda);一種細菌只在眼睛突起、出血的3號魚體內分離到,在普通營養瓊脂培養皿上形成圓形、隆起、黃色不透明的菌落,革蘭氏染色為陰性、兩端鈍圓、散在或個別成雙排列的桿菌(見圖10),經16S rDNA測序鑒定為點狀產氣單胞菌(Aeromonas punctata)。


       組織病理切片觀察顯示:鰓輕微淤血,鰓小片間細胞增生(見圖11),肝臟淤血,局部脂肪變性,肝細胞固縮,有壞死,細胞界限不明(見圖12),脾臟大量的黑色素巨噬細胞中心(見圖13),腎臟淤血,細胞有壞死(見圖14)。


       對兩種分離菌分別進行藥敏試驗,結果顯示,兩種分離菌菌對“氟多力”、“多康素”、“鰓膚康”、“鰓皮腸利康”、“出敗康”等藥物敏感(見圖15、圖16)。(利洋水產研究所 雷燕 戚瑞榮 提供 2014.03.20)


       分析:

      1、從取樣的4尾發病魚體內都分離到大量遲緩愛德華氏菌,從其中1尾眼睛突出、出血的病魚體內又分離到大量的氣單胞菌,從3尾魚體內檢測到真鯛虹彩病毒,因此本病例是愛德華氏菌、氣單胞菌和真鯛虹彩病毒混合感染引起的死亡,而且以愛德華氏菌的危害為主。個別魚發生致病力更強的氣單胞菌感染,出現突眼、出血等癥狀,可能是在愛德華氏菌基礎上的繼發感染。

       2、從3尾發病魚體內檢測到真鯛虹彩病毒,但病理組織切片上沒有見到真鯛虹彩病毒特有的腫大細胞,可能與疾病的不同發展階段有關或不同的發病魚種類有關(我們以前在發生真鯛虹彩病毒病的美國紅魚體內也沒有觀察到腫大細胞)。從發病期間水溫曾經升高到30℃(真鯛虹彩病毒一般適宜發病水溫在25℃以上),長期慢性死亡,用各種抗菌藥物治療無效等發病特征分析,檢測到的真鯛虹彩病毒在本病例中仍然有致病作用。


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